HB8

Per evidenziare le prestazioni di questa superficie, si è utilizzata una simulazione di test competitivo.

Principio del test
Una ridotta quantità di albumina biotinilata, adesa alla superficie del pozzetto, è stata fatta reagire con soluzioni a concentrazione costante di streptavidina perossidasi contenenti differenti quantità di streptavidina non marcata usate come soluzioni standard.
Dopo opportuni lavaggi per eliminare i prodotti che non hanno reagito, i pozzetti sono stati incubati con TMB e la reazione colorimetrica bloccata mediante aggiunta di acido solforico.
La lettura dell'assorbanza è stata effettuata a 450 nm.

Calcolo dei risultati
L'attività enzimatica presente nel pozzetto, è inversamente proporzionale alla concentrazione della streptavidina non marcata presente nelle soluzioni standard.

La tabella 1 mostra i valori dell'assorbanza a 450 nm per ogni concentrazione delle soluzioni standard.

La massima reattività di legame (B Max) è rappresentata dall'assorbanza ottenuta dalla streptavidina perossidasi in presenza di 0 ng di streptavidina non marcata.

La presenza di streptavidina non marcata nelle soluzioni standard è indicata utilizzando il rapporto percentuale fra l'assorbanza della soluzione standard (concentrazione B standard) e l'assorbanza ottenuta dalla streptavidina perossidasi in presenza di 0 ng di streptavidina non marcata.