test di valutazione delle piastre coattate con Germe di Grano

1. Preparare delle concentrazioni a scalare da 100 ng/ml fino a 12.5 ng/ml di AHlgG-Pod in 0.1M sodio fosfato pH 7.2 + 0.2% BSA
2. Aggiungere 100 ml di ogni soluzione ai pozzetti di una piastra coattata con Germe di Grano ed incubare a 37° per 2 ore. Aggiungere le stesse soluzioni ad una piastra coattata con Albumina come confronto per valutare la specificità del legame.
3. Svuotare i pozzetti e lavare 4 volte con 0,1M PBS pH 7,2 + 0,05% Tween^® 20 ,
4. Aggiungere 100 µl di TMB ad ogni pozzetto ed incubare per 15 minuti a temperatura ambiente
5. Bloccare la reazione aggiungendo 100 µl di acido solforico 1 N e leggere la densità ottica a 450 nm.